QINMS.com >> 首页 >>  >> 正文

核酸电泳常用缓冲液配制方法(二)

七、20×SSC

试 剂 名 称 用 量终浓度
去离子水 至1000ml/
氯化钠 175.3g3.0M
Na3citrate•2H2O(柠檬酸钠) 88.2g0.3M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.用14 N HCl调节pH值至7.0后,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。

八、20×SSPE Buffer

试 剂 名 称 用 量终浓度
去离子水 至1000ml/
氯化钠 175.3g3.0M
NaH2PO4•H2O 27.6 g0.2M
Na2EDTA•2H2O 7.4 g0.02M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.用NaON调节pH值至7.4后,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。

九、50 X Denhardt'S溶液

试 剂 名 称 用 量终浓度
去离子水 至500ml/
Ficoll 400 5g1%(w/v)
PoLyvlnylpyrrolldone 5g1%(w/v)
BSA 5g1%(w/v)

配制方法:

1.先将上述试剂加入约400ml去离子水中,充分搅拌溶解;定容至500mL。

2.用0.45µm滤膜过滤后,分装成每份25 ml,-20℃保存。

十、0.5 M磷酸盐Buffer

试 剂 名 称 用 量终浓度
去离子水 至1000ml/
Na2HPO4•7H2O 134 g0.5M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.加入85%的H3PO4(浓磷酸)调节溶液pH值至7.2,定容至1 L。

3.高温高压灭菌,室温保存。

十一、DNA变性缓冲液

试 剂 名 称 用 量终浓度
去离子水 至1000ml/
氯化钠 87.7g1.5M
NaOH 20 g0.5M

配制方法:

1.先将上述试剂加入约800ml去离子水中,充分搅拌溶解;

2.定容至1 L,室温保存。

十二、预杂交液/杂交液 (DNA杂交用)

试 剂 名 称 用 量终浓度
20×SSC(或SSPE) 30ml
50×Denhardt’s 10ml
10% SDS 5ml0.5%(w/v)
10 mg/ml Salmon DNA 1ml100ug/ml
dH2O 54ml/

配制方法:

1.先将上述试剂充分混匀后,0.45μm过滤。


上一页1】[2]【3下一页


METi. 版权所有 |