核酸电泳常用缓冲液配制方法(一)

一、50×TAE Buffer (pH8.5)

试 剂 名 称	用 量	终浓度
去离子水	至1000ml	/
Tris	242g	2M
Na2EDTA•2H2O	37.2g	100mM
乙酸	57.1ml	/

配制方法：先将Tris和Na2EDTA•2H2O在800ml超纯水中搅拌溶解，后加入乙酸并充分搅拌，用超纯水定容至1L即可。

二、10×TBE Buffer (pH8.3)

试 剂 名 称	用 量	终浓度
去离子水	至1000ml	/
Tris	108g	890 mM Tris-硼酸
Na2EDTA•2H2O	7.44g	20mM
硼酸	55g	/

配制方法：先将上述试剂在800ml超纯水中搅拌溶解，再用超纯水定容至1L即可。

三、10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer

试 剂 名 称	用 量	终浓度
DEPC处理水	至1000ml	/
MOPS	41.8g	200mM
1 M NaOAc(DEPC处理)	20ml	20mM
0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC处理)	20ml	10mM

配制方法：

1.先将MOPS在700ml DEPC处理水中搅拌溶解，用2N NaOH调节PH至7.0;

2.再向溶液中加入NaOAc和EDTA，纯化水定容至1L;

3.用0.45μm滤膜过滤，室温避光保存。

注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用，但变黑时不要使用。

四、溴乙锭 (10 mg/ml)

试 剂 名 称	用 量
去离子水	至100ml
溴乙锭	1g

配制方法：

1.先将溴乙锭在100ml去离子水中搅拌至完全溶解（约数小时），后转移至棕色瓶中室温避光保存。

2.使用时的工作浓度是0.5g/ml

3.溴乙锭是一种致癌物质，须注意安全。

五、6 × Loading Buffer(DNA电泳用)

试 剂 名 称	用 量	终浓度
去离子水	至500ml	/
EDTA	4.4g	30mM
Bromophenol Blue	250 mg	0.05%(w/v)
Xylene Cyanol FF	250 mg	0.05%(w/v)
甘油(Glycerol)	180 ml	36%(v/v)

配制方法：

1.先将除甘油外的其他试剂在200ml去离子水中加热搅拌至充分溶解

2.再加入甘油180ml，用2N NaOH调节PH至7.0;

3.定容至500ml，室温保存。

六、10 × Loadlng Buffer (RNA电泳用)

试 剂 名 称	用 量	终浓度
DEPC处理水	至10ml	/
0.5 M EDTA(pH8.0)	200 ul	10mM
Bromophenol Blue	25 mg	0.25%(w/v)
Xylene Cyanol FF	25 mg	0.25%(w/v)

配制方法：

1.先将上述试剂加入有约4ml DEPC处理水的离心管中，充分搅拌溶解；

2.再加入甘油5ml，充分混匀；

3.定容至10ml，室温保存。

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