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生化笔记

1. 血清蛋白电泳

正常血清蛋白电泳后可以分为清蛋白(57%~68%)、α1球蛋白(1.0%~5.7%)、α2球蛋白(4.9~11.2%)、β球蛋白(7~13%)、γ球蛋白(9.8~18.2%)

2. 蛋白质测定依据

1)重复的肽链结构;

2)酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收

3)与色素结合的能力

4)沉淀后借浊度或光折射测定。

3. 双缩脲法:

2个尿素分子缩合后生成双缩脲,在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应物,蛋白质中的肽链在碱性溶液中也能与铜离子作用产生紫红色的络合物。三肽以上才能反应。

4. 蛋白质浓度

蛋白质浓度g/l:1.45A280-0.74A260(用于紫外分光光度法)

5. 清蛋白测定

染料结合法,利用清蛋白与阴离子染料溴甲酚绿BCG和溴甲酚紫BCP结合的特性,而球蛋白基本不结合。

6. 苯丙氨酸测定

L-苯丙氨酸脱氢酶催化L-苯丙氨酸,同时NAD被还原成NADH,检测340nm吸光度的增强速率可反映其含量,其逆反应则可测定本丙酮酸的含量。

7. 谷氨酰胺的测定

在谷氨酰胺酶的作用下分解为谷氨酸,后者被谷氨酸脱氢酶催化,有NADH生成。

8. 正常血糖浓度:3.89~6.11mmol/l。

9. 糖尿病诊断标准

1)出现症状加上随机血糖浓度大于或等于11.1mmol/l;

2)空腹血糖大于或等于7.0mmol;

3)口服葡萄糖耐量试验OGTT,2h血糖大于或等于11.1mmol。

10. 葡萄糖测定

1) 己糖激酶法:在有己糖激酶和镁离子存在的条件下,葡萄糖被ATP磷酸化为6-磷酸葡萄糖,在NADP参与下,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶将6-磷酸葡萄糖原话成6-磷酸葡萄糖酸,同时NADP转变为NADPH。

2) 葡萄糖氧化酶法:葡萄糖氧化酶GOD催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢,在加入过氧化物酶和色原性氧受体,生成有色化合物,比色定量。

11. 总胆固醇测定

胆固醇酯CE在胆固醇酯酶作用下水解成FC(游离胆固醇)和FFA(游离脂肪酸)FC在经胆固醇氧化酶氧化成△4胆甾烯酮和过氧化氢,在分别定量氧的消耗或者过氧化氢的生成量,或者△4胆甾烯酮的生成量。

12. 游离脂肪酸测定

酶测定法,使用脂肪酶测定,分别测定产物乙酰CoA、AMP或者辅酶A(CoA)进行定量。

13. ALT测定

ALT测定

14. 总胆红素测定

总胆红素在二甲亚砜等加速剂的作用下,在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用,生成紫色的偏氮胆红素,与经过同样处理的标准溶液比较,计算之。

15. NAD

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,是脱氢酶的辅酶,如乙醇脱氢酶 (ADH),用于氧化乙醇。它在糖酵解,糖异生,三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物会将脱下的氢递给NAD,使之成为NADH。

而NADHH则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成ATP。在吸光方面,NADHH在260nm和340nm处各有一吸收峰,而NAD则只有260nm一处吸收峰,这是区别两者的重要属性。这同时也是很多代谢试验中,测量代谢率的物理依据。NAD在260nm的吸光系数为1.78×10L /(mol•cm),而NADH在340nm的吸光系数为6.2×10L/(mol•cm)。

16. AST测定

AST测定

17. CK检测

CK测定

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